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circbase数据库怎么用

官网,用ID/基因名等检索,可查看、下载数据及可视化分析

是关于如何使用CircBase数据库的详细指南,涵盖从基础操作到高级应用的全流程:

circbase数据库怎么用  第1张

访问与界面认知

  1. 进入官网:通过浏览器打开CircBase官方网站,该平台专注于存储和展示各类环状RNA(circRNA)的相关数据,支持多物种检索。
  2. 首页布局解析:主页面通常包含搜索框、分类导航栏及快速链接区域,核心功能集中于顶部的搜索模块,用户可在此输入关键词进行精准查询。

基础检索流程

步骤序号 操作描述 注意事项 示例说明
1 在搜索框中键入目标circRNA ID,并添加物种前缀(如人类为“hsa”) 确保拼写正确且区分大小写 若查找人源circRNA则输入“hsa_circRNA名称”;小鼠对应“mmu”
2 点击搜索按钮后浏览结果列表,重点关注“FASTA”“Spliced”等标签页 不同标签对应不同格式的数据 FASTA提供原始碱基序列;Spliced展示剪接位点信息
3 下载FASTA格式文件或直接查看在线预览 推荐保存本地以便后续分析 右键选择“另存为”将文件导出至本地路径
4 切换至“Spliced”视图获取拼接细节,包括外显子组成与连接方式 此信息对验证环形结构至关重要 注意记录断裂点位置用于实验设计

序列处理技巧

  1. 提取关键区域:根据研究需求截取目标片段,取前150bp和后150bp序列,并将后者置于前者之前形成新的300bp组合序列,这种操作常用于引物设计以提高特异性。
    • 实现方法:将完整序列复制到文本编辑器(如Notepad++),手动定位起始与终止位置完成剪切粘贴。
  2. 跨平台验证:将处理后的序列上传至NCBI Blast工具进行同源性比对,排除非特异性结合风险,特别关注高保守区域的匹配度评分。

引物设计与优化

  1. 参数设置要点:在使用Primer3等软件时,建议将PCR产物长度限制在70~150bp范围内,以确保扩增效率与准确性平衡,同时启用GC含量过滤功能避免二级结构干扰。
  2. 多对引物策略:系统可能返回多个候选方案,优先选择评分最高的前几组进行预实验测试,可通过梯度退火温度优化反应条件。
  3. 特异性检验:利用UCSC Genome Browser可视化引物位置,确认其唯一性及避开SNP位点,必要时采用巢式PCR进一步验证。

数据分析整合

  1. 元数据关联挖掘:除基础序列外,CircBase还提供表达谱、组织分布等注释信息,用户可通过批量下载功能获取配套矩阵文件,结合R语言或Python进行差异表达分析。
  2. 功能预测辅助:将检索到的circRNA与miRBase数据库交叉比对,推测潜在的miRNA海绵作用机制,可链接到GO富集分析工具探索生物学过程相关性。

常见问题解决方案

  1. 检索失败排查:检查物种代码是否正确;尝试简化查询词(如去除版本号后缀);若仍无结果,考虑是否因数据库未收录该条目导致。
  2. 格式兼容性问题:遇到无法识别的文件类型时,可使用在线转换工具(如Sequence Manipulation Suite)调整为常用格式。

FAQs

Q1: 如果我不知道具体的circRNA ID怎么办?
A: 可以利用高级搜索功能中的模糊匹配模式,输入部分已知字符或关联基因符号进行试探性查找,通过浏览热门研究榜单也能发现领域内重点关注的候选分子。

Q2: 为什么下载的序列有时候比预期短?
A: 这可能是由于该circRNA存在可变剪接异构体,默认显示的是最长转录本,如需完整覆盖所有变体,需进入“Isoforms”子页面逐一下载并合并比对。

通过以上步骤,研究人员能够高效利用CircBase数据库开展circRNA相关的基础研究与临床转化工作,建议定期关注数据库更新日志

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